关键词:澄清,肺病毒载体,细胞和基因治疗(CGT),膜材料,使用许多细胞和基因疗法(CGT),利用慢病毒载体(LV)将治疗性遗传材料运送到宿主细胞的早期开发中,导致了最高的生产量的延伸和延伸的过程,从而使遗传细胞促进了量度高的遗传细胞,从而超过了kossect speatign optren的过程。 。慢病毒载体的生产被广泛细分为上游(载体的产生)和下游(旨在在稳定且无菌的配方中净化和产生浓缩的高质量功能矢量)。膜加工通常在下游步骤中使用,从澄清和无菌过滤过程中的正常流量过滤(NFF)到矢量浓度或配方期间的切向流量过滤[2]。在本演讲中,我们将通过不同材料的NFF膜来阐明原油收获。不同的膜化学表现出独特的特性,可以影响污染的速度和程度。一种结垢机制是通过吸附,当饲料中的材料通过疏水相互作用或离子电荷吸引到膜表面时,可能会发生这种情况[3]。在我们的研究中,我们使用辅助HEK 293T细胞生产了瞬时转染的VSV-G型第三代LV,并通过不同的膜化学液通过0.45 µM过滤器阐明了粗糙的收获。这强调,与尼龙的功能载体67%相比,PES恢复了93%,膜材料的选择可以改善LV恢复。然后,我们应用了新型技术,例如表面Zeta电位,以预测与表面和粗糙收获饲料的相互作用。这表明与负LV粗饲料相比,尼龙具有正表电荷,这可能会导致更高的吸附率ON和与膜表面相互作用,从而导致功能矢量颗粒的损失。最后,我们使用共共聚焦(CLSM)和扫描电子显微镜(SEM)可视化膜表面的结垢和LV。已经进行了进一步的研究,以了解收获饲料的变异性(例如悬浮培养物或稳定的细胞系材料)如何改变这些相互作用,并且在何种程度上可以预处理或膜制备步骤有助于减少这些损失。行业旨在朝着可以在较小且多种设施(C级或D级)中运行的封闭的一次性系统,需要仔细选择诸如过滤膜之类的材料以进行过程兼容性和最佳恢复[4]。
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