为了访问这些优化的基因组编辑方法,我们创建了Invitrogen™Truedesign™基因组编辑器,这是一种免费的在线工具,用于设计和订购基于CRISPR-Cas9的编辑。本申请说明描述了两种用例:(1)引入诱导多能干细胞(IPSC)(IPSC)和(2)用GFP标记β-肌动蛋白的LRRK2基因(G2019S)中的SNP变化。对于SNP变化,通过在线工具自动生成了单链寡核苷核苷酸(SSODN)供体的建议设计。对于融合蛋白,使用Invitrogen™TRUETAG™供体DNA试剂盒自动生成底漆建议,以自动生成双链供体DNA。供体DNA。此应用程序说明还描述了此转染过程的详细协议。一旦输送到细胞中,供体DNA将在不到一天的时间内将其集成到目标细胞的基因组中。