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直接评估患者样本在癌症治疗中具有前所未有的潜力。液体活检中的循环肿瘤细胞 (CTC) 是临床中快速发展的原发细胞来源,是实时揭示肿瘤信息的功能分析的理想候选者。然而,缺乏允许直接从液体活检样本中直接主动询问 CTC 的常规方法,这是液体活检在临床环境中转化应用的瓶颈。为了解决这个问题,我们提出了一种使用微流体涡旋辅助电穿孔系统的工作流程,该系统设计用于对从血液中纯化的 CTC 进行功能评估。通过对野生型 (HCC827 wt) 和吉非替尼耐药 (HCC827 GR6) 非小细胞肺癌 (NSCLC) 细胞进行药物反应分析来评估对该方法的验证。被困在微尺度涡旋中的 HCC827 细胞被电穿孔以依次将药物输送到细胞溶胶中。使用自动单细胞图像荧光强度算法,对两种细胞系的电穿孔条件进行了表征,以促进多种药物的递送。能够以高纯度收集掺入血液以模拟耐药 CTC 的 HCC827 GR6 细胞,表明该装置能够最大限度地减少下游敏感细胞检测的背景细胞影响。使用我们提出的工作流程,恢复吉非替尼敏感性的药物组合反映了预期的细胞毒性反应。总之,这些结果代表了一种微流体多药筛选面板工作流程,可以实现对患者 CTC 的原位功能询问,从而加速液体活检的临床标准化。

利用微流体电穿孔器对血液中的耐药癌细胞进行敏感

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