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受控转基因表达是基因治疗、细胞治疗和生物制造不可或缺的组成部分。然而,大多数应用都基于转录因子的调控,但这种调控存在一些问题,例如表观遗传沉默,限制了表达的寿命和可靠性。组成型转基因转录与转录后基因调控相结合可以对抗沉默,但这种 RNA 或蛋白质水平平台很少存在。我们在此开发了一个 RNA 调控平台,我们称之为“PERSIST”,它由九种 CRISPR 特异性内切酶组成,作为 RNA 级激活剂和抑制剂,以及模块化 OFF 和 ON 开关调控基序。我们表明,PERSIST 调控的转基因表现出强烈的 OFF 和 ON 反应,可抵抗至少两个月的沉默,并且可以轻松分层以构建级联、逻辑功能、开关和其他复杂的电路拓扑。该平台的正交、模块化和可组合特性以及构建稳健且可预测的基因电路的便利性,为基因和细胞疗法带来了无数应用。

PERSIST 平台利用 CRISPR endoRNases 提供可编程的 RNA 调控

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