图 2. B12L 的抗 AChR 反应性和 3H9 抗体的抗 DNA 反应性。(AE)HEK293T 细胞转染了编码小鼠烟碱 AChR 五亚基的两个质粒以及 Rapsyn(HEK293T-mAChR 细胞)。(A)流式细胞术分析显示,约 30% 的细胞表达质粒 1(mTagBFP)和质粒 2(iRFP670)的报告基因。(BD)HEK293T-mAChR 细胞(B 和 D)和 WT HEK293T 细胞(C)被用作间接免疫荧光 (IIF) 的底物,以 B12L 抗体产生细胞的上清液作为主要探针。通过流式细胞术 (BC) 或显微镜 (D) 分析细胞。 (D) 中的箭头表示 AChR 簇,由重组 B12L 加与 FITC 偶联的抗人 IgG 标记(绿色)。(E) 用流式细胞术分析 6 个上清液批次中 B12L 上清液标记的 HEK293T-mAChR 或野生型细胞的比例。(F、G、H、J) 通过 ELISA (F) 或 HEp-2 免疫荧光测定 (HEp-2 IFA) (GI) 测试 3H9 抗体产生细胞 (n=6) 或野生型 (WT) 细胞的上清液的抗 dsDNA 反应性。(G) 3H9 重组抗体在 HEp-2 IFA 中呈现均质核模式,(I) 类似于具有抗 DNA 自身抗体的人血清。(J) 平均 HEp-2 IFA 滴度为 1/40。误差线 = SD