摘要。高质量基因组DNA(GDNA)的分离是植物分子生物学中的一种关键技术。GDNA的质量决定了实时聚合酶链反应(PCR)分析的可靠性。在本文中,我们报告了针对各种植物物种中实时PCR优化的高质量GDNA提取方案。在96孔块中执行,我们的协议提供了高吞吐量。不需要苯酚 - 氯仿和液氮或干冰,我们的方案比传统的DNA提取方法更安全,更具成本效益。该方法需要10毫克的叶片组织才能获得5-10μg高质量的GDNA。光谱测量和电泳用于证明GDNA纯度。提取的DNA在限制酶消化法和常规PCR中有资格。实时PCR扩增足以以非常低浓度(3 pg/μl)检测GDNA。我们的无苯酚 - 氯仿方案的GDNA稀释液标准曲线显示出比苯酚 - 氯仿方案更好的线性(R 2 = 0.9967)(R 2 =
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