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T细胞受体(TCR)曲目测序已成为理解宿主免疫系统中T细胞多样性和功能的强大工具。然而,尽管鸡在农业中的重要性和作为免疫学模型,但由于对TCR基因群的不完整基因组注释,鸡肉TCR曲目仍然很少理解。在这里,我们通过使用5'互补DNA末端(5'种族)TCR曲目测序的5'快速放大来解决这个关键问题。同时,我们增强了TCR变量(V)的基因组注释,多样性(D,仅存在于B和D基因座中),并在鸡基因组中加入(J)基因。为提高TCR注释的效率,我们开发了VJ-Gene-Finder,这是一种算法,旨在从脱氧核糖核酸(DNA)序列中提取VJ基因候选物。使用此工具,我们完成了所有已知鸡TCR基因座的全面注释,包括染色体上的A / D基因座。< / div>。进化分析表明,每个基因座通过长长同源单元的重复分别演变。为了定义健康鸡的基线TCR多样性并证明了该方法的可行性,我们表征了脾脏A / B / G / D TCR库。对曲目的分析揭示了在所有链中特异性V和J组合的优先用法,而总体特征是无偏曲线的特征。但是,B和D曲目主要是每只鸟的独特之处。我们观察到了A和G链曲目内的单个鸟类中的中等水平的共享互补性区域3(CDR3)clonotypes,包括最常见的clonotypes。总的来说,我们的TCR曲目分析使我们能够破译鸡T细胞的组成,多样性和功能。这项工作不仅代表了理解禽类T细胞生物学的重要一步,而且还将阐明宿主病原体相互作用,疫苗发育和鸟类免疫学的进化史。

用增强的基因组注释来解开鸡T细胞库

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