摘要:成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)系统,尤其是II型(Cas9)系统,在DNA打靶方面得到了广泛的发展,形成了一套成熟的精准基因编辑系统。但CRISPR-Cas系统在RNA上的基础研究和应用尚处于早期阶段。近期,CRISPR-Cas13 VI型系统的发现,为拓展RNA打靶技术提供了可能,具有广阔的应用前景。大多数VI型Cas13效应子具有双核酸酶活性,能催化前crRNA转化为成熟的crRNA,并产生较强的RNA切割活性。Cas13能特异性识别靶向RNA片段,激活Cas13/crRNA复合物进行侧切活性。 Cas13X蛋白是Cas13家族中最小的效应子,长度为775个氨基酸,由于其不受前间隔区侧翼序列(PFS)限制、易于包装、不造成永久性损伤,是一种很有前途的RNA靶向平台。本研究重点介绍了CRISPR-Cas13家族靶向RNA编辑的最新进展,并讨论了Cas13在基础研究、核酸诊断、核酸追踪和遗传病治疗中的应用。此外,我们阐明了Cas13蛋白家族的结构及其分子机制,并提出了CRISPR-Cas13家族靶向RNA编辑的未来愿景。
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