迷你启动子在体外比CAG强。(a)使用基于流式细胞术的体外测定法对有希望的迷你启动候选者的活性进行了验证。启动子候选物被克隆在双重孢子质粒中的McLover3上游,该质粒还包含TDTOMATO(RFP)表达盒,该盒被用作内部转染对照。启动子活性被量化为单个活的TDTOMATO+细胞中McLover3和TDTomato的中位荧光强度的比率。(b)使用双报告基因测定法分析,启动子在小鼠N2a和人HuH7细胞中的相对表达。(c)NGS表达(条形码)和独立测定表达(蛋白质荧光)的强相关性表现出对高通量筛选和生物信息学命中选择的预测能力的高信心。