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摘要:基于 CRISPR − Cas9 的“基因驱动”技术已被提议作为一种新颖且有效的控制蚊子传播的人类疾病的方法。然而,需要比迄今为止展示的更复杂的设计以及构建它们的扩展分子工具箱以克服抗药性形成/进化和驱动空间/时间限制的问题。预见到这种需求,我们使用三种与疾病相关的库蚊细胞系(埃及伊蚊、白纹伊蚊和致倦库蚊)评估了 33 种系统发育不同的昆虫聚合酶 III 启动子的 sgRNA 转录活性。我们表明 U6 启动子可在具有一系列转录活性水平的物种中发挥作用,并且发现 7SK 启动子由于其广泛的系统发育活性而特别有前景。我们进一步表明,U6 启动子可以被大幅截短而不会影响转录水平。这些结果对于参与开发下一代基因驱动的研究人员将具有重要意义。关键词:聚合酶 III、Cas9、U6 启动子、7SK 启动子、基因驱动、蚊子

扩展库蚊的 CRISPR 工具箱

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