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生长素诱导降解决定子 (AID) 系统是一种强大的化学-遗传方法,通过小分子进行条件性蛋白酶体降解来操纵内源蛋白质水平。到目前为止,该系统还没有在约氏疟原虫 (P. yoelii) 中进行改造,约氏疟原虫是一种重要且广泛使用的疟原虫啮齿动物寄生虫模型,可用于研究疟疾生物学。在这里,利用 CRISPR/Cas9 基因组编辑方法,我们生成了两种无标记转基因约氏疟原虫寄生虫系 (eef1a-Tir1 和 soap-Tir1),分别在 eef1a 和 soap 启动子下稳定表达水稻基因 tir1。这两条系在寄生虫生命周期中正常发育。在这些背景下,我们使用 CRISPR/Cas9 方法用 AID 基序标记两个基因 (cdc50c 和 fbxo1),并用生长素询问这两种蛋白质的表达。 eef1a - Tir1 系可在无性裂殖体和有性配子体阶段有效降解 AID 标记的内源性蛋白质,而 soap - Tir1 系可在动合子阶段降解蛋白质。这两个系将成为研究基于 P. yoelii 的疟原虫寄生虫生物学的有用资源。

约氏疟原虫的产生及其对蛋白质的条件降解

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