诱导的多能干细胞(IPSC)可以研究神经发育和神经退行性疾病,例如自闭症谱系疾病,包括脆弱的X综合征和RETT综合征,肌萎缩性侧面硬化症,阿尔茨海默氏病,阿尔茨海默氏病,帕克森氏病,亨廷顿病,亨廷顿病,亨廷顿氏病,亨廷顿病。人IPSC线是通过对成纤维细胞,头发或血液样本的重编程而产生的,这些[2]是由患有疾病相关表型的患者直接捐赠的,并且可以通过诸如CRISPR/CAS9等基因组修饰[3]引入IPSCS的基因组中,并且可以将已知的基因型或引起疾病的突变捐赠。为了研究突变对细胞水平的影响,可以将IPSC分化为与疾病相关的神经元亚型。常规分化方案依赖于在培养基中添加特定的可溶性生长因子和化合物。这些因素触发了影响转录因子(TFS)的细胞内信号传导途径,从而通过改变基因表达水平并触发基因调节网络来诱导神经元分化。然而,这些方案可能非常精致且耗时,持续数周到几个月,并在不同的发育阶段和神经胶质细胞下产生不同神经元亚型的异质混合物。在人IPSC中某些神经源TF的强制表达捷径神经元分化,导致神经发生迅速,产生了高度均匀的神经元群体[4-7]。在这里,我们描述了鲁棒诱导的神经元IPSC系的培养以及不同的方法,以将神经源性TF和基因组修饰引入人IPSC,以及如何将这些IPSC区分开为成熟的神经元。
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