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摘要:CRISPR-Cas9 正在彻底改变我们开展科学研究、治疗疾病和开发新作物的方式。这种基因组编辑技术的广泛影响使得本科生了解和使用这种新工具至关重要。在本文中,我们描述了一个为期数周的实验室模块,该模块教本科生如何设计 CRISPR-Cas9 构建体并筛选 CRISPR 修饰的基因型。该模块通过独立研究的视角进行;学生进行基因型筛选以寻找新的敲除突变。在我们的模块中,学生筛选玉米幼苗中的 MAD2 基因突变,这有助于我们正在进行的减数分裂染色体分离研究。该模块可以调整以敲除任何生物体中的任何基因,从而与教师的研究计划保持一致。参与原创研究有助于本科生在实验室中培养独立性和主动性以及 CRISPR-Cas9 的分子技术。关键词:CRISPR-Cas9、sgRNA、载体、基因型筛选 简介 革命性的基因组编辑技术 CRISPR-Cas9 正在改变我们的世界,为科学研究、医学和农业提供新工具。CRISPR-Cas9 的先驱者最近因其影响而获得诺贝尔奖(Ioannidis 等人,2020 年)。CRISPR 的强大之处在于它的精确度;与之前的技术不同,CRISPR 能够在基因组中的特定位置直接编辑遗传密码。凭借这种精确度,科学家可以删除、插入或修改任何生物体中的任何基因。这种强大的工具现已成为科学实验分子工具包中的标准工具(Adli,2018 年)。对于考虑从事生物科学职业的学生来说,使用 CRISPR 的能力至关重要。但是,了解这项技术可以让所有学生,无论职业道路如何,参与有关其道德用途的知情讨论。本文介绍了一个为期 5-6 周的实验室模块,通过让本科生参与一个新的研究项目来教他们如何使用 CRISPR。该模块分为五个单元,每个单元可以在一个 2-3 小时的实验部分中完成(表 1)。

在为期数周的实验室模块中通过新颖的研究教授 CRISPR-Cas9 基因组编辑

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