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a.bonillap@uniandes.edu.co 摘要 - 神经连接蛋白 (NL) 是跨突触细胞粘附蛋白，当它们与突触前神经连接蛋白相互作用时，参与形成突触。越来越多的证据表明它们与某些神经精神疾病有关，这使它们成为研究的相关蛋白质。神经连接蛋白-1 基因 (nlgn1) 是 NL 家族的一员，参与兴奋性突触，与压力相关疾病（重度抑郁症和创伤后应激障碍）的遗传基础有关。然而，它在压力调节中的具体作用尚未得到详细研究。斑马鱼 (Danio rerio) 已成为转化神经科学和行为研究的模型，可用于研究与焦虑、恐惧、睡眠、压力和记忆相关的行为，使其成为此类研究的理想模型。在这里，我们旨在使用 CRISPR-Cas9 系统生成 nlgn1 缺陷斑马鱼，并评估这种基因改造对幼虫行为的影响。为此，我们必须标准化 CRISPR 基因编辑系统。我们最初使用 CRISPR-cas9 生成 tyr -crispant 斑马鱼胚胎，因为这会产生可见的表型。我们用 tyr 验证了我们的 CRISPR 基因编辑系统，产生了具有不同程度嵌合性的 crispant 样表型，效率约为 76%。然后，注射了针对 nlgn1 基因的 sgRNA 的斑马鱼胚胎的存活率较低，在 11.9% 到 7% 之间，具体取决于所使用的 sgRNA。此外，许多胚胎在发育过程中出现畸形，并在 3dpf 时致命。在旷场测试期间，nlgn1 -crispant 和对照组之间的不动性平均值有显著差异。这些结果表明，神经连接蛋白-1 可能在发育过程中发挥关键作用或具有强烈的神经表型。
评估 CRISPR-Cas9 在生成中的效率......
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