(说明)[背景]试图研究基因的作用时,一种方法是防止基因工作并分析其结果。 CRISPR-CAS9是一种基因组编辑方法之一,被广泛用于停止此类基因的功能。但是,许多生存必不可少的基因很难研究,因为功能障碍可能会产生致命作用。在此类问题的情况下,研究是通过部分抑制基因功能而不是完全停止基因功能来完成的。但是,许多用于此目的的实验方法都是困难且不稳定的,并且希望开发一种简单稳定的方法来抑制基因功能。因此,在这项研究中,我们通过设计CRISPR-CAS9的使用来开发一种简单而稳定的方法,用于产生部分抑制突变体。 [研究含量]基因组DNA是生物生物的蓝图,遵循称为中心教条 *2的基本原理,并产生mRNA和蛋白质以调节细胞的功能。在“真核生物”中,是含有拟南芥 *3的植物,包括人类在当前研究中使用的动物,在从DNA产生mRNA之后,将部分mRNA切除(拼接 *4)形成成熟的mRNA。 DNA包含控制剪接的序列,但是如果在此部分发生异常,则剪接后的mRNA和蛋白质序列将变得异常。 在这项研究中,使用CRISPR-CAS9进行了基因组编辑,以创建这种异常。 CRISPR-CAS9系统旨在针对使用Gene HPY2控制剪接的序列,据报道,该基因在拟南芥中的功能显着降低,据报道,该拟南芥在模型植物的拟南芥中发芽的几天内致死。结果,我们成功地创建了拟南芥,该拟南芥具有一个序列,其中剪接控制顺序按预期去除。此外,我们证实了拟南芥中从HPY2基因产生的成熟mRNA序列比正常生成的成熟mRNA序列略短。与正常的蛋白质相比,由该mRNA产生的蛋白质可能缺乏一些序列。但是,保留了粗糙的结构,表明某些蛋白质的功能可能仍然存在。实际上,本研究中产生的突变体HPY2-CR3能够比完全失去已知HPY2基因的功能并受到致命影响的功能的寿命更长,并且有些人能够成长为可以开花的阶段。
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