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可编程的核酸酶 - ZFN,Talens和CRISPR-CAS9 - 配备了具有前所未有的能力,几乎可以随意修饰细胞和生物,在整个生命科学上都有巨大的暗示:生物学,农业,生态学和医学。基于核酸酶的基因组编辑(又称基因编辑)取决于对靶向双链断裂(DSB)的细胞反应。第一个真正可靶向的试剂是锌纤维NU-酸盐(ZFN),表明哺乳动物基因组中的任意DNA序列可以通过蛋白质工程来解决,并在基因组编辑时代介导。ZFN是锌纤维蛋白(ZFP)和FOKI裂解结构域的融合,这是由IIS型Foki型酶的基础研究产生的,该研究显示了具有可分离的DNA结合域和非特定型裂解的二重结构。对3-纤维ZFN的研究确定,预先经过的底物是配对的结合位点,这使目标识别序列的大小从9至18 bp的大小增加了一倍,足以指定植物和包括人类细胞在内的植物和哺乳动物细胞中的独特基因组基因源。随后,显示了ZFN诱导的DSB,可刺激青蛙卵中的同源性结合。基于与Foki裂解结构域融合的细菌故事的转录活化剂样核酸酶(Talens)扩大了能力。Zfn和Talens已成功地用于修改多种顽固的生物和细胞类型,这些生物和细胞类型既不是在先前证明了蛋白质工程的成功,否则很久以前就在CRISPR的到来之前很久。最近向细胞基因组传递靶向DSB的技术是RNA引导的核酸酶,如II型原核生物

生命科学的基因组编辑革命∗

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