摘要：靶蛋白降解 (TPD) 已成为药物发现领域的一种革命性方法，它利用细胞固有机制选择性地降解与疾病相关的蛋白质。纳米荧光素酶 (nLuc) 融合蛋白和 NanoBiT 技术提供了两个强大而灵敏的筛选平台，可监测 TPD 分子引起的蛋白质丰度的细微变化。尽管有这些优势，但人们还是担心由于标记系统上存在赖氨酸残基，可能会引入降解伪影，这促使人们开发替代工具。在本研究中，我们引入了 HiBiT-RR 和 nLuc K0（缺乏赖氨酸残基的变体），以减轻此类伪影。我们的研究结果表明，HiBiT-RR 与原始 HiBiT 保持了相似的灵敏度和结合亲和力。此外，nLuc WT 和 nLuc K0 构建体之间的比较揭示了某些 TPD 分子诱导的降解模式的变化，强调了选择合适的标记系统以确保研究蛋白质降解过程的实验结果可靠性的重要性。关键词：HiBiT、纳米荧光素酶、标记系统、靶向蛋白质降解 (TPD)、蛋白水解靶向嵌合体 (PROTAC)、高通量筛选