成簇的规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)-Cas13 引起了广泛关注,通常用于在 RNA 水平上控制基因表达和细胞命运。除了由其核酸内切酶活性介导的 RNA 干扰外,核酸酶失活形式的 Cas13 还提供了一个多功能的 RNA 引导的 RNA 靶向平台,用于在转录后操纵各种 RNA 修饰。化学修饰调节 RNA 命运的各个方面,包括翻译效率、可变剪接、RNA-蛋白质亲和力、RNA-RNA 相互作用、RNA 稳定性和 RNA 易位,最终协调细胞生物活动。本综述总结了 CRISPR-Cas13 系统的历史、RNA 修饰的基本组成部分以及相关的生理和病理功能。我们专注于开发基于催化失活 Cas13 的表观转录编辑工具包,包括用于腺苷脱氨的可编程 A 到 I 替换 (REPAIR) 和 xABE(腺苷碱基编辑器)、用于胞苷脱氨和 dm 6 ACRISPR 的特异性 C 到 U 交换 (RESCUE) 和 xCBE(胞苷碱基编辑器),以及使用 CRISPR-dCas13 (PAMEC) 进行 m 6 A 编辑的靶向 RNA 甲基化 (TRM) 和光激活 RNA m 6 A 编辑系统。我们进一步重点介绍了这些有用的工具包在细胞生物学、疾病和成像中的新兴应用。最后,我们讨论了潜在的局限性,例如脱靶编辑、低编辑效率和 AAV 传递的限制,并提供了可能的优化策略。
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