核孔复合物(NPC)介导细胞核和细胞质之间的所有流量,是细胞中最稳定的蛋白质组件之一。有趣的是,发芽的酵母菌细胞具有两个NPC的两个变种,它们在存在或不存在核篮蛋白MLP1,MLP2和12 PML39的情况下有所不同。这些篮子蛋白的结合发生在NPC组装中很晚,而MLP阳性NPCS 13被排除在与核仁接壤的核包膜区域中。14在这里,我们使用重组诱导的TAG交换(RITE)来研究单个NPC中所有NPC 15子复合物的稳定性。我们表明,核篮蛋白MLP1,MLP2和16 PML39通过多个细胞分割循环与NPC保持稳定,并且MLP1/2是17负责将NPC从核方区域排除。此外,我们证明了NUP2的18结合还通过独立途径从该区域耗尽了MLP阴性NPC。我们19开发了一种在萌芽酵母中进行单个NPC跟踪的方法,并观察到在没有核篮成分的情况下,NPC在没有核篮成分的情况下表现出20个迁移率。我们的数据表明,NPCS 21在核上的分布受核篮蛋白与核内部的相互作用的控制。22
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